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Axin2-CreERT2小鼠
分类: Cre鼠  发布时间: 2019-07-11 11:00 

Axin2-CreERT2小鼠
应用:Wnt/β-catenin激活的细胞
级别:SPF
类型:TG/KI
背景:C57BL/6
该Cre小鼠与FloxP小鼠交配后,在Cre特异表达的组织或者器官或细胞中,两个FloxP位点间的外显子或元件将被删除,达到条件性敲除或过表达的目的。
Cre-loxP重组系统是一种位点特异的基因重组技术,被广泛应用于特异位点的基因敲除、基因插入、基因翻转和基因易位,在真核生物和原核生物中均有广泛应用。 Cre 蛋白是一种重组酶,是causes recombination的缩写,于1981 年从 P1 噬菌体中被发现,属于 λInt 酶超基因家族。Cre 重组酶基因编码区序列全长1029bp,编码 38kDa 蛋白质,Cre 重组酶是由 343 个氨基酸组成的单体蛋白。LoxP 位点,是 locus of X-over P1的缩写,是位于 P1 噬菌体中的 34bp 序列,由两个 13bp 的反向回文序列和 8bp 的中间间隔序列共同组成,间隔序列决定 loxP 的方向,loxP 位点的序列如下所示:
13bp 8bp 13bp ATAACTTCGTATA-NNNTANNN-TATACGAAGTTAT
当细胞基因组内存在两个 loxP 位点时,一旦有 Cre 重组酶出现,就会诱导两个 loxP 位点间的序列发生重组。首先,Cre 重组酶结合到两个 13bp 的回文序列形成二聚体,然后这个二聚体和另外一个 loxP 位点上的二聚体结合,形成四聚体。LoxP 位点是有方向的,形成四聚体的两个 loxP 位点是平行的,随后这两个 loxP 位点间的双链 DNA 被 Cre 重组酶切掉,然后切口在 DNA 连接酶的作用下重新连接。
重组的结果取决于两个 loxP 位点的方向,主要有以下几种可能:
1. 如果两个 loxP 位点位于一条 DNA 链上,且方向相同,Cre 重组酶能有效敲除两个 loxP 位点间的序列;
2. 如果两个 loxP 位点位于一条 DNA 链上,但方向相反,Cre 重组酶能导致两个 loxP 位点间的序列翻转;
3. 如果两个 loxP 位点分别位于两条不同的 DNA 链或染色体上,Cre 酶能介导两条 DNA 链的交换或染色体易位。
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